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一、知识点总结
微生物生长的测定方法有多种，根据研究对象或目的选择。
1.总细胞计数法
(1)血球计数板法：血球计数板中央有一个体积一定的计数室(0.1mm3)。将菌悬液或孢子悬液在显微镜下计数，然后再按一定公式计算出细菌总数。(显微镜直接计数法)
(2)涂片计数法：将一定体积(0.1ml)的样品，均匀地涂在载片的一定面积内(1cm2)。在显微镜下计算细胞数量，推算1cm2所含细胞数目。
(3)比浊法：菌体细胞培养液混浊，在一定范围内，菌体数量与浑浊成正比，故可通过分光光度计或比色计求出浑浊度，通过与标准曲线对比，求出样品中菌液浓度，算出个体数。特点：所得结果包括死菌和活菌。
2.间接计数法(活菌计数法)
(1)涂布平板法：用灭菌的涂布器将一定体积(不大于0.1ml)的适当稀释度的菌液涂布在琼脂培养基的表面，然后保温培养直到菌落出现，记录菌落的数目并换算成每毫升试样中的活细胞数量。
(2)倒平板法：将样品稀释到一定浓度，取一定体积(0.1-1ml)倒入冷却至45℃的固体培养基混合，制成平板，培养后，出现菌落，由菌落数推算出的菌总数。
(3)滤膜过滤法：样品通过微孔滤膜后，细菌收集在滤膜上，然后将滤膜放在培养基中培养，通过菌落计数求出样品活菌落。
二、记忆小贴士
1.显微镜直接计数法的原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。(缺点是不能区分死菌与活菌)
2.间接计数法(活菌计数法)：当样品的稀释度数足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。(注意：样品稀释度。一个活细胞形成一个菌落。)
三、经典例题
对微生物细胞数目进行检测时，不属于总细胞计数法的方法是( )。
A.比浊法 B.涂片计数法 C.涂布平板法 D.血球计数板法
【答案】C。解析：对微生物细胞数目进行检测时，总细胞计数法的方法有比浊法、涂片计数法和血球计数板法，而涂布平板法属于活菌计数法。因此，答案选C。
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